Acteur américain, Frank Wolff a commencé sa carrière à la télévision au milieu des années 50. On le voit chez Roger Corman dans I Mobster (1959), The Wasp Woman (1959) et La bête de la caverne hantée (1959). Comme beaucoup d’acteurs américains dont la carrière ne décolle pas, il part en Italie où il décroche un rôle important dans Salvatore Giuliano (Rosi, 1962). On le voit encore dans des films importants comme Le procès de Vérone (Lizzani, 1963) et America, America (Kazan, 1963). Mais il entame à partir de 1966 une mue artistique en devenant un acteur culte du cinéma spaghetti.
On a pu ainsi l’apprécier dans La vengeance de Ringo (Caiano, 1966), Bravo Django / Quelques dollars pour Django (Kimovsky, 1966), Un dollar entre les dents (Vanzi, 1967), Les vautours attaquent (Cicero, 1967), Dieu pardonne… moi pas ! (Colizzi, 1967) et les chefs-d’œuvre Le grand silence (Corbucci, 1968) et Il était une fois dans l’Ouest (Leone, 1968).
Après bien d’autres prestations, on le retrouve chez Mauro Bolognini avec Metello (1970), mais aussi chez Duccio Tessari pour La mort remonte à hier soir (1970). Frank Wolff trouve son dernier grand rôle en tant que commissaire dans Milan calibre 9 (Di Leo, 1972).
Frank Wolff se suicide en 1971 à l’âge de 43 ans.