Actrice italienne, Leonora Ruffo est connue pour de belles capacités de gymnaste, ce qui la fait repérer par le réalisateur Pietro Francisci qui lui offre un rôle important dans Le prince esclave (1952). Il lui donne ensuite le rôle principal de La reine de Saba (Francisci, 1952), mais c’est surtout son interprétation dans Les vitteloni (Fellini, 1953) qui assoit sa réputation. On la retrouve à l’affiche d’Amours d’une moitié de siècle (collectif, 1954), un film à sketches. Toutefois, la suite des années 50 est moins favorable et elle tourne finalement pour la télévision, avant d’obtenir des rôles dans des péplums comme La vengeance d’Hercule (Cottafavi, 1960) et Hercule contre les vampires (Bava, 1961) où elle incarne à chaque fois Déjanire.
On la voit encore dans Maciste contre le fantôme (Corbucci, Gentilomo, 1961), Destination : planète Hydra (Francisci, 1966) et le western spaghetti La loi des colts (Dell’Aquila, 1968).
Finalement, Leonora Ruffo épouse le producteur Ermanno Curti et abandonne sa carrière en 1969. Elle décède en 2007 d’un cancer du pancréas à l’âge de 72 ans.